Анализ крови методом ифа на вирус гепатита в

Анализ крови методом ифа на вирус гепатита в

Гепатит В — заболевание, вызваемое вирусом гепатита В, поражающее преимущественно печень.

Может протекать как острое заболевание с наличием или отсутствием желтухи, подъемом температуры и другими клиническими проявлениями, заканчивается у взрослых больных в большинстве случаев (до 90–95%) выздоровлением, хотя возможна острая фульминантная форма гепатита с развитием быстрой печеночной недостаточностью и высокой смертностью.

Если самопроизвольное выздоровление не наступает, то может формироваться хронический гепатит В, и тогда с течением времени у части пациентов развивается цирроз печени и гепатоцеллюлярная карцинома (рак печени).

Вирус гепатита В передается через кровь, а также через половые жидкости. Для заражения достаточно очень малых количеств инфицированной крови. Инкубационный период заболевания составляет 1-6 месяцев.

Спектр симптоматики гепатита В варьирует от субклинических проявлений, или даже отсутствия таковых, до гепатита с желтухой или даже молниеносного, острого и подострого течения гепатита, угрожающего жизни, а во время хронической фазы- от бессимптомного хронического инфекционного состояния до хронического гепатита, цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы.

Пациенты с молниеносным фульминантым гепатитом помимо желтухи и подъема температуры могут иметь следующие признаки: нарушение сознания (печеночная энцефалопатия), кома, желудочно-кишечные кровотечения

При хроническом течениии гепатита В может не быть каких-либо признаков активного заболевания, и к пациенты чувствуют себя хорошо. Однако нередко быват неспецифические симптомы: тошнота, усталость, отсутствие аппетита.

Диагностируют гепатит В с помощью лабораторных методов: определяются повышенные уровни печеночных фермантов (АСАТ, АЛАТ, щелочная фосфатаза), может быть повышен уровень билирубина, происходят изменения в свертывающей системе крови, и доктор назначает тесты на вирусные гепатиты для поиска причины таких изменений.

Но не у каждого пациента могут быть выявлены изменения в биохимическом анализе крови.

Для выявления непосредственно вирусной причины заболевания используются серологические тесты на поверхностный антиген гепатита B (HBsAg) и антитела к ядерному антигену гепатита B (anti-HBcore) иммуноглобулина M (IgM), последний анализ необходим для диагностики острого гепатита B.

Антитела к HBsAg свидетельствуют о контакте с вирусом, они определяются в том числе после вакцинации от гепатита В, их количественное определение используется для оценки напряженности поствакцинального иммунитета.

Также используется качественное и количественное определение ДНК вируса гепатита В, в некоторых случая проводят генотипирование вируса. Применяют УЗИ, МРТ,КТ органов брюшной полости для выявления увеличения размеров печени и селезенки, развития портальной гипертензии (повышение давление в системе воротной вены печени – одно из проявлений цирроза). В определенных случаях понадобится биопсия печени или фибросканирование для определения уровня фиброза органа.

У ряда пациентов могут быть полезны анализы на на коинфекцию вирусом гепатита С, вирусом гепатита D (передается только совместно с вирусом гепатита В), вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ).

В настоящее время существует целый ряд препаратов, которые подавляют активность вируса гепатита В: пегилированный интерферон, энтекавир, тенофовир, адефовир и др.

При этом стоит понимать, что в большинстве случаев препараты не уничтожают полностью вирус гепатита В в организме, но способны устойчиво подавлять его активность, вызывая длительную ремиссию. Иногда требуется постоянный прием противовирусного препарата.

Пациенты с острым или хроническим гепатитом В без цирроза должны отказаться от употребления алкоголя, но в остальном не имеют диетических ограничений.

Чтобы предотвратить одновременное развитие жировой дистрофии печени и метаболического синдрома, рекомендуется поддержание нормальной массы тела или снижение веса при его избытке, а также адекватное лечение нарушений углеводного и жирового обмена (например, контроль диабета и дислипидемии).

Специфическим методом профилактики вирусного гепатита В является вакцинация с трехкратным введенеим рекомбинантного поверхностного антигена гепатита B (HBsAg). Серия из 3 инъекций формирует достаточный уровень антител HBsAg примерно у 95% вакцинированных людей, при этом иммунитет сохраняется обычно минимум 10 лет, но нередко отмечается более длительные сроки сохранения должного уровня иммунного ответа – до 30 лет.

источник

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.

Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.

Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.
У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.

HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.

При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg.
Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.
Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.
Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении — санации организма.

Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:

для диагностики острого гепатита В:

  • инкубационный период;
  • острый период заболевания;
  • ранняя стадия реконвалесценции;

для диагностики хронического вирусного гепатита В;

при заболеваниях:

  • персистирующем хроническом гепатите;
  • циррозе печени;

для скрининга и выявления больных в группах риска:

  • больные с частыми гемотрансфузиями;
  • больные с хронической почечной недостаточностью;
  • больные с множественным гемодиализом;
  • больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.

Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.

В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.

Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:

  • хронического вирусного гепатита В при наличии HBs антигена в сыворотке крови;
  • перенесенного вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие анти-HBcAg JgG в сыворотке крови. Положительный результат – выявление анти-HBcAg JgG свидетельствует об острой инфекции, реконвалесценции или ранее перенесенном вирусном гепатите В.

    В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
    HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.

    Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса . Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.

    Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

    Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:

  • инкубационного периода вирусного гепатита В;
  • продромального периода вирусного гепатита В;
  • острого периода вирусного гепатита В;
  • хронического персистирующего вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBeAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В или продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного.

    Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.

    Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

    Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:

  • установление начальной стадии заболевания;
  • острый период инфекции;
  • ранняя стадия реконвалесценции;
  • реконвалесценция;
  • поздняя стадия реконвалесценции.
  • диагностика недавно перенесенного вирусного гепатита В;
  • диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител к HBeAg, которые могут свидетельствовать о начальной стадии острого вирусного гепатита В, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, реконвалесценции, перенесенном недавно вирусном гепатите В или персистирующем вирусном гепатите В.

    Критериями наличия хронического гепатита В являются:

  • бнаружение или периодическое выявления ДНК ВГВ в крови;
  • постоянное или периодическое повышение активности АЛТ/АСТ в крови;\
  • морфологические признаки хронического гепатита при гистологическом исследовании биоптата печени.
  • Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
    Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.

    Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

    Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.

    Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

    Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:

  • разрешения сомнительных результатов серологических исследований;
  • выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом;
  • контроля эффективности противовирусного лечения.
  • Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

    Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.
    Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 10^3 -10^4 копий/мл. ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.

    Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.

    • Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
    • менее 2.10^5 копий/мл (менее 2.10^5 МЕ/мл) – низкая виремия ;
    • от 2.10^5 копий/мл (2.10^5 МЕ/мл) до 2.10^6 копий/мл (8.10^5 МЕ/мл) – средняя виремия;
    • более 2.10^6 копий/мл – высокая виремия.

    Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

    Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).

    Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.

    источник

    Иммуноферментный анализ – это метод диагностики вирусных заболеваний. ИФА на гепатит С показывает реакцию иммунной системы на действие патогенных микроорганизмов. Для процедуры используют венозную кровь и ищут в ней антитела к вирусу гепатита. Иммуноферментный анализ недорогой, выполняется быстро, но требует подтверждения повторным ИФА или более дорогим ПЦР.

    Метод основан на способности антител (клеток иммунной системы) образовывать комплексы с частицами вируса гепатита (антигенами). Для определения этих комплексов пользуются специальными маркерными ферментами. Анализ дает возможность выявить количество антител к вирусу в первые 6-12 недель болезни.

    Подготовка к ИФА включает:

    • исключение физических нагрузок за сутки до исследования;
    • запрет на употребление алкогольных напитков, табачных изделий и жирной пищи;
    • временное прекращение приема лекарственных препаратов и оральных контрацептивов.

    Кровь для иммуноферментного анализа на гепатит берут утром натощак. Достоверность данного метода повышается при повторном проведении ИФА спустя 2 недели после процедуры.

    Результат анализа показывает:

    1. уровень эффективности работы иммунной системы при борьбе с вирусом;
    2. стадию заболевания;
    3. течение – острый или хронический гепатит.

    Женщинам в период беременности необходимо сдать кровь на ИФА минимум два раза:

    • на ранних сроках (4-5 недель);
    • перед родами;

    Преимущества ИФА заключаются в:

    • доступной стоимости анализа для всего населения;
    • полной автоматизации процесса, исключающей ошибку человека;
    • быстром получении результата анализа;
    • возможности выявить инфекционное заболевание на ранних этапах;
    • высокой точности.

    Гепатит С – опасное вирусное заболевание, которое передается через кровь и разрушает клетки печени.

    Показания к анализу крови на ВГС:

    • наличие ВИЧ-инфекции;
    • симптомы острого гепатита: рвота, вялость, чувство горечи во рту, отсутствие аппетита, желтушный цвет кожных покровов и др.;
    • хронический гепатит;
    • наличие в биохимическом анализе крови повышенного билирубина и изменение коэффициента де Ритиса (указывают на нарушения работы печени);
    • принадлежность к группе риска (врачи, медсестры, наркозависимые);
    • наркотическая и алкогольная зависимость.

    Проверку на гепатит С обязаны проходить военные, сотрудники правоохранительных органов, работники общепита и социальных служб.

    Анализ на гепатит С, проведенный методом ИФА, способен обнаружить антитела двух типов:

    IgM – иммуноглобулин, имеющий самую крупную молекулярную массу и неспособный проникать через плацентарный барьер. Антитела класса IgM вырабатываются в организме первыми – спустя 6 недель после заражения. Через полгода уровень иммуноглобулинов типа М снижается и остается таким до следующего рецидива болезни (при хроническом гепатите). Иммуноглобулины M являются основой первичного иммунного ответа зараженного организма.

    IgG – основной иммуноглобулин сыворотки крови, является вторичным иммунным ответом. Обеспечивает иммунитет ребенка, рожденного от инфицированной матери. Иммуноглобулины G вырабатываются спустя 3 месяца после возникновения заболевания, достигают максимальной концентрации на пятом месяце и остаются в этом количестве на протяжении многих лет.

    В периоде острого вирусного гепатита есть две стадии. На первой происходит активация и выделение IgM, на второй – IgG. В острой фазе болезни IgM и IgG образуются к нуклеокапсидному белку вируса Core. При латентном (скрытом) течении вырабатываются IgG к белку core и неструктурному белку NS.

    Диагностика гепатита включает два способа проведения ИФА – прямой и непрямой.

    Прямой метод ИФА на антитела к гепатиту С основан на образовании комплексов антиген-антитело.

    1. В специальную таблицу с лунками заносят биологический материал пациента (кровь) и оставляют на 30 минут. Важные элементы приклеиваются ко дну лунок.
    2. Добавляют специальные меченые антитела. Они прикрепляются к антителам исследуемой крови (если такие есть). Здесь выжидают несколько часов.
    3. Содержимое лунок сливают и промывают от лишних веществ.
    4. В каждую лунку добавляют ферменты, которые распознают добавленные ранее антитела. Ферменты связаны со специальным маркером.
    5. При положительной реакции маркерное вещество становится окрашенным.

    Эта методика включает несколько простых шагов и обеспечивает достоверный результат.

    Непрямой метод ИФА отличается тем, что в системе участвуют не два, а три компонента.

    • Конкурирующий: в исследуемую систему добавляют антигены, кровь пациента, в которой предполагается наличие иммуноглобулинов, и антитела, помеченные ферментом. Две группы антител вступают в борьбу за образование комплексов с антигеном. Положительной реакция считается при максимальном количестве антител первой группы и минимальном – второй группы.
    • Сэндвич-ИФА: в лунки заносят антитела к исследуемому антигену, после чего добавляют кровь и новые антитела. Исследуемый антиген оказывается между двумя молекулами иммуноглобулинов. Этот «сэндвич» виден визуально или при подсвечивании специальным спектром.

    Существует четыре варианта расшифровки анализа:

    1. Положительный результат. В исследуемом материале обнаружены IgM и IgG к вирусу гепатита – означает, что человек заражен давно (более 3 месяцев назад). Если обнаружены только IgM, то инфекция попала в кровь месяц назад, если только IgG – произошло выздоровление или хронизация гепатита.
    2. Отрицательный результат. Иммуноглобулинов в исследуемой крови не обнаружено. Человек полностью здоров.
    3. Ложноположительный результат. ИФА всегда нужно проверять полимеразной цепной реакцией (выявляет сам вирус в крови или печеночной ткани). Если ПЦР дает отрицательный результат, то ИФА следует провести заново.
    4. Сомнительный результат. Если прошло очень мало времени после рискованной ситуации, ИФА может не выявить наличия антител. Для подтверждения результата необходимо провести повторный анализ через две недели.

    Ложноположительный и ложноотрицательный результаты ИФА могут возникнуть вследствие ошибки в лаборатории или неправильной подготовке к анализу. У беременных ложные результаты встречаются чаще, чем у остальных людей.

    Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – дополнительный метод диагностики вирусных заболеваний. Выявляет РНК вируса, то есть его генетическую информацию, применяется для подтверждения диагноза. В некоторых случаях ПЦР дает отрицательный результат при положительном показателе ИФА.

    • Выздоровление: ПЦР реагирует только на РНК вируса гепатита, а ИФА может дать положительный результат и после выздоровления, ведь он выявляет клетки иммунной системы, которые сохраняются в крови на несколько лет.
    • Разный исследуемый материал: при заборе из разной локализации может возникнуть несоответствие результатов. Так, для ПЦР берут не только кровь, но и кусочек ткани печени.
    • Разные тестовые системы.

    После пройденной терапии против гепатита С необходимо еще раз сдать кровь на ИФА.

    Иммуноглобулины G сохраняются в организме несколько лет после выздоровления, поэтому повторный анализ на гепатит может быть положительным. В этом случае необходимо дополнительно сдать кровь на ПЦР. Отрицательный результат ПЦР на гепатит будет свидетельством того, что человек здоров, а положительный – подтвердит ИФА и укажет на некачественное лечение.

    Отрицательный результат повторного ИФА является подтверждением выздоровления.

    ИФА относится к лабораторным методам высокой точности и позволяет выявить заболевание на ранних сроках. При первых симптомах гепатита нужно срочно обратиться к врачу, который назначит необходимые анализы для подтверждения диагноза.

    источник

    Как уже было сказано, не всегда можно получить положительный анализ. Иногда расшифровка показывает искаженные результаты. Различные по природе факторы влияют на процесс исследования. Правда, показатель ложноположительный встречается достаточно редко.

    Анализ ложноположительный будет зафиксирован в том случае, когда антитела присутствуют, но при этом результаты показывают, что возбудителя нет.

    Также встречается ложноположительный ответ при проведении ПЦР (полимеразной цепной реакции). То есть расшифровка демонстрирует отсутствие вируса. Поэтому чтобы получить достоверный положительный или отрицательный показатель, понадобится обследование комплексное. Так можно точно определить, превышена ли норма и насколько.

    Какие факторы провоцируют ложноположительный ответ?

    Результаты обследований могут искажаться при наличии:

    • недугов, имеющих аутоиммунный характер;
    • онкологии;
    • тяжелой инфекционной болезни;
    • сбоев в иммунитете;
    • доброкачественных опухолей;
    • криоглобулина в крови в большом количестве;
    • аутоиммунного гепатита;
    • инфекционного заболевания острой формы верхних дыхательных путей.

    Также следует добавить беременность, получение прививки от гриппа либо столбняка, применение препаратов, которые стимулируют деятельность иммунной системы. Кроме того, ложноположительный анализ бывает тогда, когда само обследование проводится с нарушениями.

    Как и любые другие гепатиты, заболевание, вызванное вирусом HBV, в первую очередь поражает печень.

    Вклиниваясь в гепатоциты (печеночные клетки), вирус начинает выстраивать на их основе собственные ДНК и усиленно размножаться, тем самым провоцируя аутоиммунный цитолиз гепатоцитов, то есть разрушение печеночных клеток собственной иммунной системой.

    Это усложняет подбор лечебных средств, поскольку интерфероны в этом случае только ускорят аутоиммунный цитолиз. Существуют некоторые отличия HBV от других видов заболевания.

    1. Тяжелой острой форме HBV характерно бурное, с яркой симптоматикой, развитие почти сразу после инфицирования. Фульминантное (молниеносное) течение болезни быстро приводит к развитию комы и летальному исходу, но такие случаи, к счастью, редки.
    2. Если гепатитом B заразился новорожденный ребенок, можно на 90% быть уверенным, что болезнь приобретет хроническую форму.
    3. У взрослых, напротив, в 90% случаев инфекцию удается полностью локализовать.
    4. Если заболевание долго протекало бессимптомно, это, как правило, заканчивается перетеканием в хроническую форму.
    5. Хроническая форма HBV является наиболее частой причиной развития цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы (рака).
    6. Вирус HBV считается одним из самых инфекционных вследствие необычайной устойчивости во внешней среде.
    7. Ввиду однотипности вируса HBV, вакцинация от гепатита B , в отличие от HCV, существует.

    При обследовании пациента врач может значительно сузить круг потенциальных диагнозов. В этом ему помогают симптомы, появившиеся у больного.

    На поздних этапах развития гепатита В главным симптомом становится желтушность кожи. Слизистые оболочки тоже могут приобрести желтый цвет, но происходит это на тех стадиях, когда полное излечение оказывается почти невозможным.

    Врачи отмечают, что обращаться к специалистам нужно как можно раньше, поскольку тогда и вероятность исцеления или наступления ремиссии окажется выше. Следующие симптомы могут тревожить пациента на ранних этапах развития гепатита В:

    1. Общая слабость организма, апатия, низкая трудоспособность.
    2. Тошнота, которая часто сопровождается рвотными позывами.
    3. Легкая боль в области печени, под ребрами справа.
    4. Кожная сыпь.
    5. Боль в суставах.
    6. Проблемы в работе пищеварения, которые оборачиваются отсутствием аппетита и диареей.

    Для выявления болезни этих симптомов недостаточно, но устный опрос является важной частью диагностики. Обычно для сужения круга потенциальных болезней врачи задают следующие вопросы:

    • имелся ли контакт с больным, у которого был диагностирован гепатит В;
    • каков характер сексуальных отношений, когда в последний раз был половой контакт, и был ли он защищен;
    • имелось ли введение наркотических или любых других средств внутривенно за последние несколько месяцев;
    • проводилось ли хирургическое вмешательство;
    • проводилось ли переливание крови.

    Вирус гепатита В может передаваться во время полового контакта, через кровь, а иногда и через слюну больного. Заражение может произойти при введении наркотиков, а также при использовании нестерильных медицинских инструментов.

    Сложнее всего определить момент заражения, поскольку вирус может развиваться в организме, поражая печень в течение нескольких месяцев. Именно поэтому при опросе врач ставит временные рамки до полугода.

    В настоящее время в отечественной медицине используются несколько основных лабораторных методов определения гепатита B. Диагностика HBV включает:

    • иммуноферментный анализ (ИФА) для определения наличия в крови антител к вирусу HBV (анти-HBV), который на сегодня считается наиболее надежным, быстрым и недорогим исследованием;
    • исследование крови на наличие ДНК вируса с помощью полимеразно-цепной реакции (ПЦР), по результатам которой можно определить наличие и активность вируса (вирусную нагрузку);
    • биохимический анализ крови на уровень билирубина, щелочной фосфатазы, печеночных ферментов (АЛТ и АСТ), позволяющий судить о наличии воспалительного процесса в печени.

    Понятно, что направление на эти анализы дается врачом в том случае, если симптоматическая картина состояния больного и изучение его анамнеза наталкивает на мысль об инфицировании HBV либо для контроля состояния при хроническом процессе.

    Наиболее достоверным методом определения степени патологических изменений в печени до недавнего времени считалась биопсия органа. Это исследование фрагмента печени, извлеченного чрескожным методом при помощи специальной иглы.

    Процедура выполняется под местной анестезией и редко вызывает осложнения, хотя и относится к хирургическим вмешательствам.

    Сегодня существуют более современные и менее травмирующие способы:

    Последние 2 теста основаны на исследовании крови по ряду показателей с использованием специальных алгоритмов. А фиброэластография дает возможность определять плотность паренхимы печени при помощи метода, похожего на ультразвуковое исследование.

    Диагностика гепатита Б может быть ошибочной вследствие ряда причин:

    • загрязнения биологического материала;
    • ошибки аналитической системы;
    • ошибки лаборанта.

    Последнее, к сожалению, встречается очень часто. Поэтому одноразовой сдачи крови на исследование для диагностики гепатита B недостаточно.

    Анализы следует сдавать повторно и не в одной, а разных лабораториях, а при необходимости — обращаться к более современным и точным методам диагностики.

    Для исключения внешних влияний на результаты исследования следует придерживаться следующих правил накануне сдачи анализа:

    1. Воздержаться от приема пищи за 12 часов до сдачи крови.
    2. Отказаться от курения за полчаса до исследования.
    3. За полчаса до сдачи анализа воздержаться от чрезмерного эмоционального и физического напряжения.

    Анализ на гепатит b всегда подразумевает сдачу крови, поскольку по этому биологическому материалу можно многое сказать о состоянии печени. При диагностировании нужны следующие анализы крови:

    1. Биохимический, который позволяет выявить отсутствие или присутствие АСТ и АЛТ в крови. Данные ферменты располагаются только в клетках печени, гепатоцитах. Когда происходит повреждение данных клеток, ферменты попадают в кровь. Значительное увеличение количества АСТ и АЛТ в крови говорит о серьезных заболеваниях печени.
    2. Также проводится анализ ПЦР (полимеразная цепная реакция) крови. Встречаются две разновидности ПЦР: количественная и качественная. При качественном анализе ПЦР выявляется наличие вируса гепатита (HBV). При количественном анализе выявляется число данных вирусов в 1 мл крови, что позволяет сделать выводы об их активности.
    3. Иммуноферментный анализ крови, который помогает выявить наличие или отсутствие самого вируса. Данные антитела появляются в крови на ранних стадиях заболевания. Обнаружив их, врач может смело ставить диагноз.

    Чаще всего для диагностики используется ПЦР и ИФА-анализ. Обычная биохимическая оценка крови позволяет выявить лишь повышенное число ферментов, но не причину, приведшую к отклонению. Повышение количества АЛТ и АСТ в крови может быть связано с разными факторами, поэтому поставить диагноз «гепатит В» со 100%-й точностью не удастся.

    Задача лабораторного исследования выявить специфические антитела гепатита в крови и антигены, которые говорят о наличии и активности ВГВ. Именно они являются маркерами гепатита в.

    На выявлении маркеров вирусных гепатитов основаны практически все диагностические тесты. Маркеры гепатита в представлены в таблице, с ее помощью можно самому расшифровать диагноз.

    Достоверно верифицируется вирусный гепатит B только путем выявления специфических антигенов вируса в крови методом ИФА или РИА. Это — HBsAg, HBeAg, HBcAg.

    Кроме того, достоверным маркером гепатита B является обнаружение иммуноглобулина анти-HBc, анти-HBs, анти-HBe (IgM, IgG). Так, HBsAg обнаруживается в крови в инкубационном периоде заболевания, буквально через 2–4 недели после инфицирования у приблизительно 80% пациентов.

    При адекватном лечении через 3–4 месяца антиген HBs в крови исчезает, и к этому моменту концентрация антител (иммуноглобулин M) к антигену HBs (анти-HBs) в крови становится максимальной.

    Концентрация антигенов (HBsAg) тем ниже, чем тяжелее течение болезни. Так, при молниеносном течении вследствие массовой гибели вирусов HBsAg выявляется только самыми чувствительными методами, в то время как антитела (анти-HBs) к частицам вируса обнаруживаются раньше.

    Таким образом, факт выявления в крови пациента антигенов вируса и антител к ним необходимо увязывать с клинической симптоматикой, чтобы не прийти к ложным выводам относительно стадии болезни и тяжести ее течения.

    Выявление специфического маркера гепатита B (анти-HBc, который относится к иммуноглобулинам группы M) считается наиболее достоверным признаком заболевания и практически с полной вероятностью подтверждает диагноз.

    IgM сохраняется в крови на протяжении всей болезни вплоть до полного выздоровления. Иммуноглобулин группы M является маркером острой фазы заболевания.

    Затем его концентрация в крови идет на спад, и через 2–3 месяца после выздоровления выявляются уже иммуноглобулины группы G (анти-HBc), обеспечивающие длительный иммунитет (практически пожизненный) у более чем 80% пациентов.

    Кроме HBsAg в период инкубации в крови может обнаруживаться HBeAg, однако он не стоек и быстро разрушается при воздействии факторов иммунитета (уже в среднем через неделю после появления).

    К концу данного периода нарастает концентрация антител к HBe. Но если уровень антител нарастает медленно, а антигены HBe выявляются на протяжении месяца и более, это свидетельствует о переходе болезни в хроническую фазу.

    Диагноз вирусного воспаления печени подтверждают специальные исследования. Прежде чем пройти курс терапии, больной сдает анализы:

    1. Кровь пациент предоставляет на исследование в утренние часы, между 7.00 и 9.00. Больному следует воздержаться от приема пищи на 12 часов. Количественный анализ на гепатит В определяет наличие вируса и титр антител в сыворотке крови. Одновременно врач назначает исследование, определяющее ДНК HBV с помощью реакции ПЦР.
    2. У инфицированных пациентов устанавливают наличие белка Anti-HBc IgG и антигена HBsAg . Специфический иммуноглобулин указывает на стремительный рост концентрации вируса гепатита в сыворотке крови пациента. В случае отрицательного теста на Anti-HBc IgG проводят дополнительное исследование на наличие других заболеваний.
    3. Изучая период обострения болезни, определяют иммуноглобулины HBeAg и Anti-HBc IgM. Установление правильного диагноза возможно только после обнаружения вирусной РНК — гепатит в этом случае подтверждается молекулярно-биологическим методом.
    4. Широко применяется для диагностики болезней печени реакция ПЦР — количественный метод позволяет назначить эффективное лечение гепатита.

    Для определения активности возбудителя назначают анализ ПЦР. Он устанавливает уровень вирусной нагрузки и шансы пациента на выздоровление. Полимеразная цепная реакция проводится после окончания латентного периода. В процессе исследования определяют не только HBsAg, но и маркер HBeAg.

    Расшифровка анализа ПЦР на гепатит позволяет установить степень активности патологического процесса и эффективность комплексной терапии.

    Врач определяет, насколько организм больного восприимчив к противовирусным препаратам, можно ли принять меры для устранения причин развития хронического заболевания печени. В этом случае возрастает показатель трансаминазы, а индекс активности возбудителя в несколько раз превышает нормальный показатель, концентрация аминокислоты составляет более 106 копий ДНК на 1 мл.

    Норма трансаминазы в крови соответствует значениям ферментов АсАТ и АлАТ. Аланинаминотрансфераза у женщин не превышает 32 Ед/л, а у мужчин — 40 Ед/л. Концентрация вируса для людей, инфицированных в раннем возрасте — 100000 копий на 1 мл.

    В неактивной фазе вируса и в случае появления Anti-HBc ДНК HBV находится в пределах 2000 МЕ/мл, а количество копий не превышает 10000.

    Единственным анализом крови в диагностике гепатита В не обойтись. Исследование вируса включает в себя несколько сложных диагностических тестов, которые необходимы для наблюдения за течением ВГВ, определения его периода и стадии, а также для оценки прохождения противовирусной терапии.

    Исследования назначают для выявления HBsAg в крови, а также до, во время и после терапии.

    Самым ранним показателем активности вируса в крови считается HBsAg — специфический белок, входящий в структуру вирусной оболочки. Второе его название — поверхностный антиген.

    Достоверность результатов может вызывать вопросы у врача, поэтому нужно знать, не только какие анализы нужно сдать, но и как правильно подготовиться к обследованию. Это необходимо для того, чтобы получить максимально правдивые результаты.

    1. Кровь нужно сдавать натощак. Биохимия крови и серологические тесты не исключение. Пищу желательно не принимать за 8-12 часов до сдачи анализов. Чай, кофе и другие напитки тоже могут стать причиной отклонения от нормы, поэтому от их употребления следует воздержаться.
    2. За пару суток до сдачи анализов нужно устроить разгрузочные дни, во время которых нужно исключить из употребления острую, жирную, жареную пищу. Эти продукты влияют на выработку специальных ферментов, отражающихся на результате диагностики.
    3. За 72 часа до сдачи нужно полностью исключить спиртные напитки.
    4. За пару недель до сдачи нужно прекратить прием лекарств. Если по каким-либо причинам отменить препараты невозможно, нужно сообщить об этом врачу.
    5. Некоторые специалисты считают, что на данные обследования могут повлиять активные физические нагрузки, употребление желтых или оранжевых овощей и фруктов, физиопроцедуры, УЗИ и рентген, а также менструация у женщин.

    Эти правила помогают получить правдивый результат обследования, по результатам которого будет назначено соответствующее лечение.

    После того, как пациент сдал кровь на hbs, ему нужно будет ждать результаты. В разных медицинских учреждениях срок составляет от одного дня до недели. Результатами расшифровки анализа занимаются только специалисты. Полученные данные можно расшифровать так:

    • Если hbsag обнаружен, то считается, что этот человек инфицирован.
    • Если анти hbs положительный, это значит, что патология присутствует в организме. Anti-HBs-антитела появляются в фазе выздоровления после острого гепатита В.
    • Если anti hbe положительный, это значит активность вируса в организме снижена.

    Для диагностики гепатита B используется метод ПЦР. С его помощью можно достоверно обнаружить генетический материал (ДНК) вируса в клетках организма: в крови, в гепатоцитах, в лимфоцитах — во всех местах, где происходит процесс репликации вирусных частиц.

    В таблице представлены различные варианты и комбинации антигенов и антител (полученные методом ИФА, РИА) и ДНК вируса (ПЦР), характерные для определенных периодов болезни.

    источник

    Оставьте комментарий 3,052

    Для выявления вирусных гепатитов в организме медицина широко применяет метод иммуноферментного анализа, основанного на выявлении концентрации и вида антигенов с помощью антител и ферментов. Проводится поэтапно, путем лабораторных исследований, с высокой точностью показаний. В зависимости от количества и класса антител изменяется цвет и концентрация фермента, который использует ИФА и, согласно этому, врач диагностирует заболевание.

    Наличие вирусного гепатита в организме больного определяют с помощью серологического метода анализа крови на присутствие вируса HCV и маркеров (тел и антител), на него указывающих. Иммуноферментный анализ (ИФА) исследует разные вирусы, низкомолекулярные соединения, макромолекулы, их качественный и количественный показатели, используя проявление реакции на их антигены. Для этого применяют фермент, как метку для сигнальной регистрации. Его все шире используют в медицине, поскольку ИФА четко находит строго определенные антигены, не путая их с другими, имеет высокую чувствительность к наличию инвазии при вирусном гепатите.

    Минус такой диагностики — невозможность выявить причину болезни, так как метод указывает только на реакцию иммунной системы организма. На результаты анализа влияет вакцинация, проведенная ранее. За 8 часов перед проведением анализа рекомендуется воздержаться от приема пищи, никотина, алкоголя. Основа ИФА теста — ферментативная и иммунная реакция организма на вирус. Биологические молекулы связываются с клеткой и ее элементами, микроорганизмами, обнаруживают вирус, далее работают ферменты, которые позволяют выразить иммунную реакцию в видимый и измеримый параметр.

    Вирусные гепатиты в организме могут стать причиной возникновения онкологических заболеваний и цирроза печени. Важность своевременной диагностики неоспорима. Первичным способом диагностики является тест ИФА, который с высокой точностью определяет наличие HCV вируса (IgM и IgG) и активность его микроэлементов. В обязательном порядке анализы на вирусный гепатит сдают:

    1. Люди с групп риска (наркозависимые, болеющие СПИДом, работники медицинских и правоохранительных учреждений).
    2. Люди с острой или хронической формой гепатита.
    3. Беременные и планирующие беременность женщины.

    ИФА распознает болезнь на любой стадии. Результаты анализа, в среднем, готовы за 2 дня.

    ИФА тест определяет наличие антител класса IgG, IgM, IgA. При диагностике вирусного гепатита врач не обращает внимания на их тип, так как присутствие любого такого проявления вируса HCV уже указывает на острую или хроническую стадию протекания болезни. На ранних стадиях заболевания повышается уровень IgM (через 5 дней после заражения); на 15—20 день появляются IgG антитела и могут долгое время находиться в крови человека даже после излечения; IgA — появляется через 10—14 дней, снижается после лечения.

    В случае, если IgG и IgA обнаруживаются после применения препаратов и их уровень остается в том же показателе — у носителя хроническая форма гепатита. Важным критерием теста будет четкое определение класса имеющихся антител и их количества. На основании этого можно знать не просто о наличие заболевания, но и стадию его развития. Обнаружение таких элементов в крови больного дает возможность назначить правильное и своевременное лечение для предотвращения более тяжелых последствий.

    Выделяют прямой и не прямой тест ИФА. Этапы прямого:

    1. Сбор биологического материала и размещение его в специальных лунках.
    2. В течение 15—30 мин. антигены прикрепляются к поверхности лунок.
    3. Добавление антител в лунки к найденному антигену. Оставляется все на 1—5 часов.
    4. Удаления неприкрепленных антигенов (выливание содержимого лунок).
    5. Ополаскивание лунок специальным раствором.
    6. Добавления ферментного раствора в лунки. Оставляют на 30 мин.—1 час.
    7. Использование колориметрии (выявление цвета и концентрации окраса содержимого лунки, сопоставление с показателями, которые прямо пропорциональны с концентрацией вируса).

    Использование для диагностики непрямого метода ИФА даст более точный результат.

    Непрямой метод ИФА проходит при применении немеченных антител к найденным антигенам и впоследствии добавлении к ним меченных. Сначала берется кровь у пациента и разносится по лункам на 15—30 мин. (антитела фиксируются с лунками). Потом в них вносятся немеченные антитела на 1—5 часов (образуется связь антител с антигенами — иммунный комплекс). Далее не прикрепленные микроэлементы выливаются с лунок и промываются специальным раствором. На следующем этапе лаборант добавляет в лунки меченные микроэлементы на 15—30 мин. (при этом связываются немеченные с меченными с образованием комплекса «антитело-антитело-антиген»). Повторно удаляются лишние (незакрепленные) при сливании и промывке раствором. Далее вносится фермент, который меняет цвет за 5—30 мин. пребывания в лунках и данные окраса сверяются с данными показателей таблиц. Непрямой метод ИФА более точный.

    Иммуноферментный анализ позволяет выявить наличие инфекции (вирусы гепатита всех видов, ВИЧ, герпес, сифилис, цитомегаловирус, корь, краснуху, вирус паротита, вирус Эпштейн-Барра), является маркером аутоиммунных заболеваний, раковых клеток. Указывает на нарушения репродуктивных функций (изменения уровня тестостерона, пролактина, эстрадиола и прогестерона), сбой работы щитовидной железы, инвазию гельминтами, хламидиями. Эффективен для выявления уреаплазмоза, коклюша, вируса Данге, вируса Западного Нила, Боррелии. Список определений высок, включает много наименований.

    Определение антигена вируса HCV методом ИФА дает 98% точность. Его также используют для повторного тестирования биологического материала при нечетких предыдущих показателях. Наличие IgM антигенов не является показателем на гепатит острой формы и требует дополнительных исследований. При повторном проведении ИФА теста результаты совпадают на 90—100%. В случаях минимального расхождения как показатель принимается среднее значение. Для получения максимальной точности в показателях врачи советуют параллельно проводить биохимический анализ крови. Для проверки результатов после иммуноферментного анализа можно использовать другие способы диагностики.

    ИФА гепатит С определяет эффективно, это один из методов диагностики заболевания, основанный на взаимодействии антигенов и антител. Иммунохимическая реакция путем ИФА (иммуноферментного анализа) позволяет выявить в организме анти-HCV антитела. Метод дает возможность дифференциальным путем диагностировать у человека гепатит С, определить стадию развития заболевания, спрогнозировать его течение. Выявление специфических серологических маркеров позволяет также подобрать эффективное противовирусное лечение патологии.

    Анализ на выявление в крови человека антител к вирусу гепатита типа C проводится путем присоединения к молекуле иммуноглобулина чужеродного микроорганизма (антигена). Присоединенный энзимный фермент играет роль своеобразной метки. Она позволяет проследить за иммунохимической реакцией, а также одним из ее компонентов.

    В качестве компонентов иммуноферментного анализа могут выступать:

    • антитела;
    • антитела, помеченные специальным ферментом;
    • антигены;
    • субстраты ферментов;
    • индикаторные красители.

    При попадании в организм человека вредоносных чужеродных микроорганизмов защитные силы начинают вырабатывать иммуноглобулины (антитела). Впоследствии они воздействуют на антигены и нейтрализуют их. Такое взаимодействие приводит к образованию антитела-антигена, имеющего свои показатели количества и качества. Именно они свидетельствуют о наличии либо отсутствии в организме HCV-инфекции. В случае если результат иммуноферментного анализа положительный, имеет место вирус гепатита типа С.

    Современные технологии в медицине позволяют значительно сократить сроки выявления вируса гепатита, протекающего в острой форме. Благодаря диагностическим системам третьего поколения также представляется возможным повысить специфичность и чувствительность иммунохимической реакции.

    Основным исследуемым материалом при проведении ИФА выступает венозная кровь (в том числе донорская). По показаниям могут производить забор спинномозговой жидкости или околоплодных вод.

    Положительный результат метода ИФА на гепатит типа С не всегда свидетельствует о наличии вирусной инфекции в организме. В более чем 35 % случаев в крови вирусных антигенов не обнаруживается, что приводит к ложноположительному результату.

    Метод позволяет следить за количественными и качественными изменениями, разграничением острой и хронической формы гепатита С. Однако для определения активности патологического процесса он малоэффективен. Для более точного подтверждения наличия HCV-инфекции следует применять также другие методы диагностики патологии.

    Метод выявления видовой и количественной концентрации чужеродных микроорганизмов (антигенов) при помощи иммуноглобулинов и ферментов проводится в несколько этапов. На основании изменения цвета и количественного показателя фермента врач может диагностировать у человека гепатит типа C.

    В большей степени заболеванию подвержены следующие категории людей:

    1. Пациенты, перенесшие хирургические вмешательства, а также заболевания внутренних органов и систем.
    2. ВИЧ-инфицированные (инфицированные вирусом иммунодефицита человека). Большой процент людей, входящих в эту группу, составляют наркозависимые люди.
    3. Медицинские работники.
    4. Сотрудники правоохранительных органов.
    5. Беременные женщины.

    Гепатиты вирусного происхождения нередко приводят к развитию онкологического заболевания (например, рака печени). Именно поэтому сдавать кровь на иммуноферментный анализ следует в первую очередь людям, входящим в основную группу риска, а также больным с острой либо хронической формой гепатита.

    По показаниям врач может назначить проведение метода ИФА пациентам, у которых диагностируется:

    • ИППП (инфекции, передающиесяполовым путём);
    • заболевания вирусной природы происхождения (папилломавирус, герпетическая инфекция, гепатит и т. д.);
    • аллергический характер патологии;
    • иммунодефицитное состояние;
    • онкология.

    ИФА гепатит С позволяет выявлять на ранней стадии, а также в бессимптомной и безжелтушной формах. Как и у любого метода диагностики, он имеет ряд преимуществ и недостатков.

    Среди положительных особенностей ИФА специалисты выделяют:

    1. Точность качественных и количественных показателей. Чувствительность метода превышает другие исследования на выявление гепатита в десятки раз.
    2. Значительное сокращение сроков выявления вирусной инфекции благодаря современным диагностическим системам.
    3. Невысокая цена по сравнению с другими исследованиями на выявление гепатита у человека.
    4. Возможность диагностирования заболевания печени на ранней стадии при отсутствии выраженных симптомов.
    5. Поэтапное проведение исследования с использованием автоматизированных процессов.

    Несмотря на высокую точность ИФА, более чем в 35 % случаев при положительном результате вирус гепатита у пациента не выявляется. Нередко тест не подтверждает патологию, что свидетельствует о сомнительном или отрицательном результате.

    На достоверность исследования в той или иной степени влияет:

    1. Прием лекарственных препаратов.
    2. Нарушения обменных процессов в организме.
    3. Наличие некоторых патологий хронического характера, способствующих активной выработке иммуноглобулинов.

    Учитывая недостатки результатов опыта инвитро методом ИФА, пациенту назначаются дополнительные исследования. Для достоверного обнаружения антител к вирусной инфекции гепатита С применяется метод ПЦР (полимеразной цепной реакции) либо RIBA (рекомбинантный иммуноблоттинг).

    Анализ методом ИФА способен выявить широкий ряд заболеваний у человека.

    Помимо обнаружения антител гепатита всех видов, положительный результат теста может свидетельствовать о наличии в организме следующих патологий:

    • вируса иммунодефицита человека;
    • герпетической инфекции;
    • сифилиса;
    • ИППП (уреаплазмоза, хламидиоза и др.);
    • папилломавируса;
    • цитомегаловируса.

    Исследование также является своеобразным маркером по обнаружению злокачественных новообразований, генетических патологий, гормональных нарушений, а также сбоев в функционировании эндокринной системы.

    Подготовка к сдаче биологического материала на выявление вируса гепатита С подразумевает отказ от приема пищи и медикаментов за 12 часов до проведения исследования. Также необходимым условием является воздержание от употребления алкоголя, жирных, жареных и соленых блюд.

    Основные этапы при проведении прямого теста заключаются в следующем:

    1. Вначале лаборант производит забор крови из вены (либо другого биологического материала), а затем помещает ее в специальные емкости.
    2. Чужеродные микроорганизмы (антигены) в течение 20 минут начинают прикрепляться к ним.
    3. Специалист добавляет иммуноглобулины (антитела) к найденным антигенам для образования иммунной реакции. При этом компоненты оставляются на несколько часов.
    4. Неприкрепленные антигены удаляются путем выливания содержимого из емкостей.
    5. Материал ополаскивается раствором, а затем обрабатывается ферментами и оставляется на один час.
    6. Цвет и концентрация содержимого анализируются благодаря использованию колориметрии.

    Если количественный показатель содержимого превышает допустимые нормы, то это свидетельствует о наличии вируса гепатита С в организме человека.

    Подразумевает взаимодействие непомеченных иммуноглобулинов с антигенами, к которым впоследствии присоединяют помеченные антитела.

    В начале у пациента берется кровь из вены. Затем биологический материал помещается в специальные емкости примерно на полчаса. При этом непомеченные антитела присоединяются к стенкам емкостей. Затем к ним добавляются помеченные антитела. В результате их взаимодействия образуется иммунный комплекс «антитело-антиген».

    По истечении 4 часов содержимое емкостей выливается, а неприкрепленные микроэлементы удаляются. Лаборант присоединяет помеченные антитела к уже образовавшемуся комплексу, при этом происходит иммунная реакция «антитело-антитело-антиген».

    После повторного удаления незакрепленных микроэлементов в емкость добавляется специальный фермент, меняющий цвет и количественные показатели содержимого. На основании полученного результата специалист сверяет данные и делает заключение.

    При проведении ИФА внимание уделяется наличию либо отсутствию антител классов IgA, IgG и IgM. Количественные показатели этих антител сверяются с данными специальной таблицы.

    Согласно ей, расшифровка результатов сводится к следующему:

    1. Если все три типа показателей не определяются, у человека наблюдается полное выздоровление.
    2. При одновременном положительном результате по всем трем показателям, наблюдается острая форма вирусной инфекции.
    3. Если определяются антитела класса IgG, при этом остальные классы не выявлены, то у человека развился постинфекционный иммунитет.
    4. На хронический характер заболевания указывают положительные показатели антител классов IgG и IgA. При этом они остаются неизменными даже после медикаментозного лечения.
    5. При положительном выявлении всех трех типов антител может наблюдаться рецидив хронического характера гепатита.

    Согласно статистическим данным, уровень IgM начинает повышаться через несколько дней после попадания инфекции в организм, что свидетельствует о ранней стадии патологии. IgG антитела обычно проявляются через 2 недели после начала заболевания и находятся в крови на протяжении длительного периода времени (даже после выздоровления). Антитела IgA обнаруживаются через 2 недели, при этом после медикаментозной терапии их концентрация в организме снижается.

    Помните, что гепатит С ИФА положительный не всегда свидетельствует о наличии инфекции. Нередко тест считается ложноположительным, что требует повторной сдачи крови. В некоторых случаях пациенту назначают дополнительные исследования для более точного определения показателей крови.

    Основным критерием при проведении теста является точное выявление количественных и типовых показателей. Они позволяют определить не только наличие вируса, но и форму заболевания. Диагностика гепатита С при помощи современных методов позволит начать своевременную медикаментозную терапию и минимизировать негативные последствия.

    Может ли анализ на гепатит С быть ошибочным? К большому сожалению, такие случаи иногда бывают. Эта патология опасна тем, что после заражения симптомы часто отсутствуют у человека в течение многих лет. Точность в диагностике гепатита С особенно важна, так как при несвоевременном выявлении и лечении недуг приводит к катастрофическим осложнениям: циррозу или раку печени.

    Вирусы гепатита C передаются через кровь, поэтому важен ее анализ. Иммунная система вырабатывает против возбудителей болезни белковые антитела — иммуноглобулины М и G. Они являются маркерами, посредством которых печеночная инфекция диагностируется при применении иммуноферментного анализа (ИФА).

    Примерно месяц спустя после инфицирования или при обострении хронического гепатита С формируются антитела класса М. Наличие таких иммуноглобулинов доказывает: организм поражен вирусами и стремительно уничтожает их. В ходе выздоровления пациента численность этих белков неуклонно сокращается.

    Антитела G (anti-HCV IgG) формируются значительно позже, в период от 3 месяцев до полугода после вторжения вирусов. Их обнаружение в кровотоке сигнализирует о том, что инфицирование случилось давно, поэтому острота болезни миновала. Если таких антител немного и в повторном анализе становится еще меньше, это свидетельствует о выздоровлении больного. Но у пациентов с хроническим гепатитом С иммуноглобулины G присутствуют в кровеносной системе всегда.

    В лабораторных анализах определяют и наличие антител к неструктурным вирусным белкам NS3, NS4 и NS5. Anti-NS3 и Anti-NS5 выявляются на ранней стадии болезни. Чем больше их показатель, тем вероятнее, что она станет хронической. Anti-NS4 помогают установить, давно ли инфицирован организм и как сильно поражена печень.

    У здорового человека в анализах крови нет АЛТ (аланинаминотрансферазы) и АСТ (аспартатаминотрансферазы). Каждый из данных печеночных ферментов свидетельствует о ранней стадии острого гепатита. Если же обнаружены оба, то это может сигнализировать о начале некроза клеток печени. А наличие фермента ГГТ (гамма-глутамилтранспептидазы) — один из признаков цирроза органа. Доказательством разрушительной работы вирусов является и присутствие в крови билирубина, фермента ЩФ (щелочной фосфатазы), белковых фракций.

    Самая точная диагностика при правильном ее проведении — методом ПЦР (полимеразной цепной реакции). Основывается она на выявлении не иммунных антител, а структуры РНК (рибонуклеиновой кислоты) и генотипа возбудителя гепатита С. Используют 2 варианта этого метода:

    • качественный — есть вирус или нет;
    • количественный — какова его концентрация в крови (вирусная нагрузка).

    «Анализ на гепатит С — отрицательный». Такой формулировкой подтверждается отсутствие болезни при качественном исследовании методом ПЦР. Аналогичный результат количественного теста ИФА показывает, что в крови нет антигенов вируса. В иммунологических исследованиях иногда указывают их концентрацию ниже нормы — это тоже отрицательный результат. Но если антигенов нет, а антитела к ним есть, данное заключение сигнализирует о том, что пациент или уже переболел гепатитом С или недавно был вакцинирован.

    «Анализ на гепатит С — положительный». Такая формулировка требует уточнения. Позитивный результат лаборатория может выдать человеку, который когда-то болел им в острой форме. Эта же формулировка применима и к людям, которые в настоящее время здоровы, но являются вирусоносителями. Наконец, это может быть ложный анализ.

    В любом случае необходимо провести исследование повторно. Больному с острым гепатитом С, находящемуся на лечении, врач может назначать тестирование через каждые 3 дня, чтобы отслеживать эффективность терапии и динамику состояния. Пациент с хроническим недугом должен сдавать контрольные анализы через каждые полгода.

    Если результат теста на антитела положительный, а заключение исследования методом ПЦР отрицательное, считается, что человек потенциально инфицирован. Чтобы убедиться в наличии или отсутствии антител, проводят диагностику методом RIBA (РИБА — рекомбинантного иммуноблота). Данный метод информативен через 3–4 недели после инфицирования.

    Во врачебной практике различают 3 варианта неадекватных результатов диагностического исследования:

    • сомнительный;
    • ложноположительный;
    • ложноотрицательный.

    Иммуноферментный метод считается весьма точным, но порой он дает ошибочную информацию. Сомнительный анализ — когда клинические симптомы гепатита С у пациента есть, но маркеров в крови нет. Чаще всего это происходит при слишком ранней диагностике, поскольку антитела не успевают сформироваться. В таком случае делают повторный анализ через 1 месяц, а контрольный — через полгода.

    Ложноположительный анализ на гепатит С врач получает, когда методом ИФА обнаруживаются иммуноглобулины класса М, а методом ПЦР РНК вируса не выявляется. Такие результаты нередко бывают у беременных женщин, пациентов с иными типами инфекции, онкобольных. Им тоже нужно делать повторные тесты.

    Ложноотрицательные результаты появляются весьма редко, например, в инкубационном периоде болезни, когда человек уже инфицирован вирусом гепатита С, но и иммунитет к нему, и симптомы еще отсутствуют. Такие результаты могут быть у пациентов, которые принимают препараты, подавляющие защитную систему организма.

    Гепатит С протекает по-разному в зависимости от генотипа вируса. Поэтому в ходе диагностики важно определить, какой из 11 его вариантов находится в крови пациента. У каждого генотипа есть несколько разновидностей, которым присвоены буквенные обозначения, например 1а, 2в и т. д. Точно подобрать дозировки препаратов, длительность лечения можно, узнав вид вируса.

    В России распространены преимущественно генотипы 1, 2 и 3. Из них хуже и дольше всего лечится генотип 1, особенно подтип 1в. У вариантов 2 и 3 более благоприятные прогнозы. Но генотип 3 может приводить к тяжелому осложнению: стеатозу (ожирению печени). Бывает, пациент инфицируется вирусами сразу нескольких генотипов. При этом один из них всегда доминирует над другими.

    Диагностика гепатита С показана, если:

    • возникли подозрения на нарушения в деятельности печени;
    • получены сомнительные данные о ее состоянии при УЗИ органов брюшной полости;
    • в анализе крови содержатся трансферазы (АЛТ, АСТ), билирубин;
    • планируется беременность;
    • предстоит операция.

    Ложноположительные анализы, когда инфекции в организме нет, но результаты указывают на ее наличие, составляют до 15% лабораторных исследований.

    • минимальная вирусная нагрузка в начальной стадии гепатита;
    • прием препаратов-иммунодепрессантов;
    • индивидуальные особенности защитной системы;
    • высокий уровень криоглобулинов (белков плазмы крови);
    • содержание гепарина в крови;
    • тяжелые инфекции;
    • аутоиммунные заболевания;
    • доброкачественные новообразования, раковые опухоли;
    • состояние беременности.

    Ложноположительные результаты тестов возможны, если у будущей матери:

    • нарушается обмен веществ;
    • имеются эндокринные, аутоиммунные заболевания, грипп и даже банальная простуда;
    • появляются специфические белки беременности;
    • резко снижается уровень микроэлементов в кровотоке.

    Кроме того, при проведении тестов на гепатит С причины ошибок могут заключаться в человеческом факторе. Нередко сказываются:

    • низкая квалификация лаборанта;
    • ошибочный анализ чужой крови;
    • некачественные химические реактивы;
    • устаревшие медицинские приборы;
    • загрязнение образцов крови;
    • нарушения правил их транспортировки и хранения.

    Любая лаборатория может иногда ошибаться. Но это возможно при тестах только ИФА или только ПЦР. Поэтому при проведении диагностики заболевания следует применять оба метода исследования. Тогда оно наиболее достоверно, поскольку сложно допустить ошибку, если в крови нет вируса.

    Важно делать анализ на гепатит С, когда нет никаких недомоганий, даже легкой простуды. Не требуется сдавать кровь натощак. Следует только накануне отказаться от жирных, жареных, острых блюд, не употреблять спиртное. И последнее: первоначальный ложноположительный результат о гепатите С — не повод для паники. Вывод нужно делать лишь после дополнительных исследований.

    Заболевания печени в современном мире очень актуальны, ведь этот орган подвержен негативному влиянию со стороны окружающей среды, неправильного образа жизни и т.д.

    Но есть такие заболевания, которыми заразиться может абсолютно каждый, и предугадать, произойдет это или нет – крайне сложно. Это, например, вирусные гепатиты, которые передаются в основном через кровь и изначально не дают о себе знать. В частности, речь идет о С-гепатите.

    То, что вирус изначально не подает особых признаков серьезно затрудняет постановку диагноза, но, тем не менее, существуют достаточно эффективные и разнообразные исследования, которые помогут точно указать на проблему.

    Основной принцип обнаружения заболевания HCV – расшифровка анализов на гепатит С, то есть сравнение определенных показателей с нормами.

    Диагностику гепатита С проводят людям по разным причинам, в основном это:

    • подозрение на возможный гепатит;
    • человек находится в группе риска;
    • диагностика обязательна в виду специфики работы;
    • женщинам во время беременности или при планировании.

    Видов диагностик несколько: какие-то из них – это поверхностные исследования, другие – глубокие и высокоточные, принцип которых – изучение минимальных отклонений нормальных показателей или обнаружение специфических веществ.

    Для обнаружения вируса гепатита С в крови человека используют 3 вида диагностических методов, это:

    1. Иммуноферментный анализ (ИФА). Проводится в лаборатории, принцип заключается в определении антител к гепатиту, в частности: IgG, IgM. Эта диагностика не даст развёрнутого ответа: болен человек или нет, ведь у трети носителей антитела не обнаруживаются. Происходит это из-за промежутка между попаданием в тело вируса и выработкой к нему антител, поэтому это сомнительный и очень поверхностный анализ.
    2. Рекомбинантный иммуноблотинговый анализ. Его проводят лишь для подтверждения лабораторного исследования, если результат положительный, значит, человек является или являлся переносчиком заболевания. Антитела к вирусу не выводятся сразу даже после успешного лечения гепатита. Кроме того, возможен ложный результат из-за некоторых сторонних факторов.
    3. Полимеразный (ПЦР) анализ. Какой самый точный метод в определении гепатита? – однозначно ПЦР. Является самым молодым и самым высокоточным способом диагностики. Именно ПЦР может дать развернутый ответ о протекании заболевания, позволяет установить концентрацию вируса в крови и его генотип (всего их 6). Принцип основывается на обнаружении ДНР/РНК вируса в плазме крови. Этот метод обходит все вышеперечисленные по качеству диагностики: до клинических проявлений гепатита должно пройти минимум 20, максимум – 120 суток, до выработки антител – 10-12 недель после проникновения вируса. А вот обнаружение в крови возбудителя никак не может оказаться ложным, единственное ограничение: с момента заражения должно пройти 5 суток, ведь в исследуемом объеме крови вируса может еще не быть.

    ПЦР проводят для точной постановки диагноза, бывает он трех подвидов:

    1. Качественный анализ. С его помощью определяют только наличие вируса.
    2. Количественная диагностика. Используется для определения точного содержания вируса в объеме крови; при лечении используется для проверки эффективности.
    3. Генотипическая диагностика. Используется для определения генотипа, а в последствии и фенотипа вируса. Знать генотип возбудителя крайне важно для терапии, ведь в зависимости от особенностей меняется курс и концентрация приема препаратов.

    В методах диагностики важную роль играют дополнительные анализы, которые, порой, полностью изменяют особенности лечения, а иногда могут указать даже на другой диагноз.

    Биохимический анализ

    Для того, чтобы правильно назначит лечение и не усугубить картину, нужно достоверное определить степень поражения печени, для этого используют биохимический анализ крови, который покажет отклонения от нормы в её составе.

    Изменения характеризуют особенности поражения печеночной ткани, это: стадия заболевания, тяжесть фиброза, нарушения работы печени. Биохимический метод покажет реальные цифры содержания в крови билирубина, белка, мочевины, креатинина, сахара, АСТ и АЛТ, щелочной фосфатозы, железа и гамма-глютамилтрансспептидазы. Кроме того, будет определен липидный профиль и качество белкового обмена.

    Фиброзо-диагностика

    Фиброз – поражение тканей печени, от его степени зависит особенности курса, поэтому диагностика тяжести поражения тканей очень важна. Судя по картине протекания заболевания, врач может судить о срочности лечения: если ситуация некритичная, его могут даже отложить, чтобы не наносить препаратами вред другим органам.

    Другие анализы

    Иногда, для того чтобы получить полную картину болезни, используют УЗИ брюшной полости и щитовидной железы, общий анализ крови. Людям преклонного возраста проводят диагностику сердечно-сосудистой и пищеварительной системы, легких.

    Если возможности провести стандартные ИФА/ПЦР-анализы нет, проходят специфические: анализ слюны и других жидкостей на наличие возбудителя.

    Технологии проведения диагностики на гепатит С находятся на высоком уровне и, зачастую, не выдают ложных результатов.

    Несмотря на это, невозможно предоставить 100%-ю гарантию точности: возможны ложно-положительные результаты.

    Дать неправильный ответ исследование крови может в случае несоблюдения правил анализа или при некоторых других факторах. Основные причины искажения результатов:

    • некоторые специфические инфекции, что реагируют с экранирующими веществами и тест оказывается положительным;
    • исследование при беременности;
    • наличие в организме побочных веществ;
    • нарушение работы иммунной системы;
    • нарушение правил забора крови.

    Расшифровкой анализов на гепатит занимается опытный специалист, который определит отклонения от нормы каждого из показателей и напишет заключение насчет вероятности гепатита.

    При диагностике методами ИФА, обнаружение антител в крови будет безошибочно говорить о том, что в теле человека есть или был вирус гепатита: либо пациент болен сейчас, либо перенес болезнь и антигены просто не успели вывестись из организма. Следует помнить, что антитела врабатываются не сразу – должно пройти определенное время, чтобы такой анализ дал достоверные результаты, поэтому при необходимости нужно повторно сдать кровь на проверку.

    Если диагностика ПЦР дала положительный ответ, то с вероятностью 99% в организме находится возбудитель. В этом случае нужно определить степень тяжести и провести генотипирование rna для коррекции курса, а затем неотложно начинать лечение, чтобы гепатит не перерос в хронический. Данные полимеразных анализов считаются очень точными, ведь способны выявить вплоть до 1 представителя вируса в клетке. Если норма протекания полимеразной цепной реакции не нарушена – значит ответ отрицательный и волноваться не стоит.

    При установлении гепатита С используют количественное определение показателей билирубина, АЛТ и АСТ, белков. Их содержание так же говорит о степени и тяжести заболевания.

    Общая таблица показателей веществ в крови, которые могут указывать на С-гепатит после биохимического анализа:

    источник



    Источник: art-mylife.ru


    Добавить комментарий