Креатинин в крови прибор
КРЕАТИНИН –ВИТАЛ-02/12
ЦЕНА
НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ КРЕАТИНИНА В СЫВОРОТКЕ (ПЛАЗМЕ) КРОВИ И МОЧЕ МЕТОДОМ, ОСНОВАННЫМ НА РЕАКЦИИ ЯФФЕ, С ДЕПРОТЕИНИЗАЦИЕЙ
Кат. № В 04.02 – 200 определений
Кат. № В 04.12 – 500 определений
( при объеме пробы 2,0 мл)
ПРИНЦИП МЕТОДА
Метод основан на реакции Яффе. Креатинин в щелочной среде образует с пикриновой кислотой окрашенный комплекс. Концентрация креатинина измеряется колориметрически.
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ)
Негемолизированная сыворотка (плазма) крови,
суточная моча.
Мочу развести в 10 раз бидистиллированной водой.
СОСТАВ НАБОРА
РЕАГЕНТ № 1 – ПИКРИНОВАЯ КИСЛОТА
Пикриновая кислота………………………….35 ммоль/л
РЕАГЕНТ № 2 – НАТРИЙ ЕДКИЙ
NaOH…………………………………………0,75 моль/л
РЕАГЕНТ № 3 — КАЛИБРАТОР
Креатинин…………………………………177 мкмоль/л
РЕАГЕНТ № 4 – ТРИХЛОРУКСУСНАЯ КИСЛОТА
ТХУ…………………………………………….1,2 моль/л
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Линейность – отклонение не более 8 %
до концентрации 440 мкмоль/л.
Чувствительность – не более 40 мкмоль/л
Коэффициент вариации – не более 8 %
Время проведения анализа – 45 мин.
ХРАНЕНИЕ
1. Срок годности набора – 12 мес
( хранение при 18-25°С).
2. Срок годности вскрытого реагента № 3 – 12 мес
(хранение при 2-4°С)
ВНИМАНИЕ! Тщательно закрывайте флаконы непосредственно после каждого использования реагентов.
ПРИМЕЧАНИЕ
Несмотря на популярность в нашей стране, данный метод определения не позволяет точно определить истинные значения концентрации креатинина вследствие высокой зависимости реакции от величины рН, температуры и времени инкубации. Значительно более точные результаты возможно получить при использовании псевдокинети-ческого метода (Кат. № 004.007). Кроме того, реагенты в кинетических наборах подобраны так, что устраняется влияние билирубина и ряда других интерферирующих веществ. Для получения абсолютных значений используют масс-спектрометрию, хроматографические методы или наборы реагентов, основанные на энзиматическом определении креатинина.(Кат. № 004.008, № 004.009).
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Длина волны: 505 нм (ФЭК – 490 нм).
Длина оптического пути: 1 см.
Температура инкубации : 25°С
Фотометрирование: против холостой пробы.
1. ПОДГОТОВКА ПРОБ К АНАЛИЗУ
Внести в пробирки:
Проба № 1 (сыворотка, плазма) |
Проба № 2 (моча) |
Раствор для холостой пробы |
|
Сыворотка, плазма |
0,5 мл |
— |
— |
Моча |
— |
0,5 мл |
— |
Бидистиллир. вода |
1,0 мл |
0,25 мл |
0,75 мл |
Реагент № 4 |
0,5 мл |
0,25 мл |
0,25 мл |
Пробы перемешать, инкубировать 10 мин при 18-25 °С.
Пробы №№ 1 и 2 центрифугировать в течение 12-15 мин при 900 g. Раствор для холостой пробы центрифугировать не нужно.
Прозрачный супернатант использовать для дальнейшего анализа. Супернатант может храниться 7 суток при температуре 2-4°С.
2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ КРЕАТИНИНА
Внести в пробирки:
Проба № 1 |
Проба № 2 |
Калибр. проба |
Холостая проба |
|
Супернатант |
1,0 мл |
1,0 мл |
— |
— |
Раствор для холостой пробы |
— |
— |
— |
1,0 мл |
Реагент № 3 |
— |
— |
1,0 мл |
— |
Реагент № 2 |
0,5 мл |
0,5 мл |
0,5 мл |
0,5 мл |
Реагент № 1 |
0,5 мл |
0,5 мл |
0,5 мл |
0,5мл |
Пробы перемешать, инкубировать точно 20 мин при 25°С. Фотометрировать.
РАСЧЕТЫ
Расчет концентрации креатинина (С):
в сыворотке (плазме):
С= Аоп 1/Акал´ 177 [мкмоль/л],
где: Аоп 1— адсорбция опытной пробы,
Акал-адсорбция калибровочной пробы,
177 мкмоль/л – концентрация креатинина в калибраторе;
в моче:
С= Аоп 2/Акал´ 8,85 ´К [ммоль/сутки],
где: Аоп 2— адсорбция опытной пробы,
Акал-адсорбция калибровочной пробы,
8,85 ммоль/л – концентрация креатинина в калибраторе с учетом разведения,
К – количество суточной мочи.
НОРМАЛЬНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ
В сыворотке (плазме):
мужчины: 61-115 мкмоль/л,
женщины: 53-97 мкмоль/л.
В моче:
8,8-13,3 ммоль/сутки.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Правильность проверена при помощи контрольных сывороток “Precinorm U & “Precipath U” (Roche Diagnostics, Швейцария).
Источник: labdiagnostics.ru