Проба розина на билирубин

Проба розина на билирубин

Только для IN VITRO диагностики!

  • Кат.№ 326.1.400 — 400 определений (при конечном объеме 2 мл) 

Принцип метода:

В результате реакции между билирубином и диазотированной сульфаниловой кислотой образуется окрашенный комплекс, имеющий максимум поглощения при длине волны 540 нм. Для определения общего билирубина необходима диссоциация неконъюгированного (непрямого, свободного) билирубина, что достигается введением в реакционную смесь кофеина. При определении содержания конъюгированного (прямого, связанного) билирубина кофеин из реакционной смеси исключается. Концентрация неконъюгированного билирубина рассчитывается по разнице концентрации между общим и конъюгированным билирубином.

Исследуемый материал:

Сыворотка крови. Гемолиз недопустим. Хранить в темноте

Состав набора и условия хранения:

  1. Сульфаниловая кислота — 24 ммоль/л.
  2. Нитрит натрия — 72 ммоль/л.
  3. Кофеиновый реагент:
    • Кофеин — 240 ммоль/л;
    • Бензоат натрия — 250 ммоль/л.
  4. Физиологический раствор.
  5. Калибратор  — 85,5 мкмоль/л.

Компоненты набора стабильны в течение 12 месяцев при хранении при температуре 18-25°С.

Дата изготовления, серия, номер по каталогу и срок годности указаны на упаковке набора.

Аналитические характеристики набора:

  • Линейность  — от 2,0 до 270 мкмоль/л.
  • Коэффициент вариации — не более 5%.

Приготовление калибратора:

Внести во флакон с калибратором  2,0 мл бидистиллированной воды.  После  полного  растворения   концентрация билирубина — 85,5  мкмоль/л. Данный раствор стабилен  в течение 5 дней при температуре  2-8°С. Реагент светочувствителен. Хранить в темноте!

Приготовление диазореагента:

Смешать растворы сульфаниловой кислоты и нитрита натрия в соотношении 10 : 1.  Диазореагент стабилен 10 дней при  температуре 2-8°С в плотно закрытом флаконе в темноте.

Процедура анализа:

1. Определение содержания общего билирубина:

Поместить в пробирки Опытная проба, мл Контроль на реактивы для пробы, мл Калибратор,  мл Контроль на реактивы для калибратора, мл
 Диазореагент 0,55 0,55
 Сульфаниловая кислота —- 0,5 0,5
 Кофеиновый реагент 1,25 1,3 1,25 1,3
 Сыворотка крови 0,2 0,2
 Калибратор —- 0,2 0,2
Смешать и инкубировать при температуре 18-25 °С в течение 20 минут. Измерить оптическую плотность пробы (Епробы) и калибратора (Екалибратора) против соответствующих  контролей на реактивы при λ = 540      (500-560) нм и d = 1 см. 

2. Определение содержания связанного билирубина:

Поместить в пробирки Опытная проба, мл Контроль на реактивы для пробы, мл Калибратор,  мл Контроль на реактивы для калибратора, мл
 Диазореагент 0,55 0,55
 Сульфаниловая кислота 0,5 0,5
 Физиологический раствор 1,25 1,3
 Кофеиновый реагент 1,25 1,3
 Сыворотка крови 0,2 0,2
 Калибратор 0,2 0,2

Смешать и инкубировать при температуре 18-25 °С в течение 5 минут. Измерить оптическую плотность пробы (Епробы) и калибратора (Екалибратора) против соответствующих  контролей на реактивы при λ = 540      (500-560) нм и d = 1 см. 

Расчет:

 Проба розина на билирубин

Диагностическая информация:

1. Общий билирубин. 

­↑. Повреждение печеночных клеток, обтурация внутри и внепеченочных желчных протоков, гемолитические болезни, физиологическая желтуха новорожденных, синдром Криглера-Найяра, болезнь Жильбера, синдром Дабина-Джонсона, нарушение толерантности к фруктозе, синдром желтухи при грудном вскармливании, гипотиреоз, преходящая семейная гипербилирубинемия у детей.

2.Связанный билирубин

­↓. Обтурация внутри и внепеченочных желчных протоков, повреждение печеночных клеток (особенно на поздних этапах болезни), синдром Дабина-Джонсона, синдром Ротора, холестаз.

 3.Несвязанный билирубин

­↑. Гемолитические состояния или те, которые связаны с разрушением гемоглобина, фаза выздоровления при остром гепатите или сепсисе, преходящая гипербилирубинемия новорожденных, синдром Криглера-Найяра, болезнь Жильбера.

Литература:

  1. Jendrassik L., et al. Biochem.Z. 1938, vol.297, p. 81.
  2. Энциклопедия клинических лабораторных тестов (под  ред.  Н.У.Тица). «Лабинформ», Москва,1997, стр. 84-86.

Параметры программирования:

Наименование набора реагентов Билирубин ПРЯМОЙ Билирубин ОБЩИЙ
Тип анализатора (полуавтомат/автомат) полуавтомат полуавтомат
Метод измерения КТ КТ
Длина волны, нм 540 (500-560) 540 (500-560)
Измерение против  бланка пробы бланка пробы
Температура реакции, °С
Фактор
Концентрация стандарта 85,5 85,5
Соотношение реагент/ проба (мкл/мкл)
Количество измерений, не менее 1 1
Время преинкубации,  сек
Время реакции, сек
Единицы измерения мкмоль/л мкмоль/л
Верхний предел реагент бланка, А 2,00 2,00
Нижний предел реагент бланка, А 0,00 0,00
Максимальное DЕ/мин
Границы линейности 2,0-270 2,0-270
Максимум нормы 3,4 21
Минимум нормы 0 5
Подтверждение линейности (да/нет) нет нет



Источник: vita-ros.ru


Добавить комментарий